本发明公开了一种两性离子功能化生物材料、其制备方法及应用，生物材料技术领域。一种两性离子功能化生物材料的制备方法包括：将具有聚胺‑酚涂层的基材与同时含有碳碳双键和羧基的化合物反应，以在基材表面形成含有碳碳双键的聚胺‑酚涂层；利用含有碳碳双键的聚胺‑酚涂层与含有碳碳双键的两性离子化合物反应，以在基材表面形成两性离子功能化的聚胺‑酚涂层。利用碳碳双键的聚合形成具有一定空间结构和多功能的大分子聚合物长链，亲水端暴露在外侧使亲水性增加，分子间聚集程度增大，进而逐渐沉积在材料表面形成稳固的涂层，制备得到具有多种生物功能的材料，如超亲水、抗凝、抗菌等。