本发明公开了一种检测19－去甲睾酮的方法及其专用酶联免疫试剂盒。该检测19－去甲睾酮的酶联免疫试剂盒，包括19－去甲睾酮特异性抗体及包被原和酶标记物；所述包被原为19－去甲睾酮半抗原与载体蛋白的偶联物或抗抗体；所述酶标记物为酶标抗抗体或酶标19－去甲睾酮半抗原；当所述包被原为19－去甲睾酮半抗原与载体蛋白的偶联物时，所述酶标记物为酶标抗抗体；当所述包被原为抗抗体时，所述酶标记物为酶标19－去甲睾酮半抗原。本发明的方法操作简便、费用低廉、灵敏度高、能够现场监控且适合大量样本筛查的检测动物组织、尿样中19－去甲睾酮药物残留量。