一种鸡精原细胞分离纯化方法，涉及转基因、珍稀物种的保存和组织与细胞工程等领域。本发明先分离鸡精原细胞，然后进行Percoll分离、贴壁纯化，本发明首次对不同时期鸡胚的睾丸，比较以组合酶和Percoll介质梯度的分离方法，并依据睾丸细胞不同贴壁特性进行纯化，以探索合适的鸡精原细胞分离方法、时期、及精原细胞纯化的可能性。通过从鸡睾丸组织中分离出精原细胞，并经过Percoll梯度离心和贴壁纯化方法进一步对鸡精原细胞进行纯化，能制备出睾丸细胞数和存活率都较高的生精上皮细胞悬液，而且还能确保去除睾丸中其它体细胞成分。