基于Ngpiwi蛋白介导的牛源大肠杆菌基因敲除菌株及其构...
授权
摘要
本发明公开了一种基于Ngpiwi蛋白介导的牛源大肠杆菌基因敲除菌株及其构建方法；所述牛源大肠杆菌基因敲除菌株为在牛源大肠杆菌基因组上缺失潜在毒力相关基因的ORF序列或部分序列的缺失菌株。该方法首先成功构建带有Ngpiwi和待缺失靶基因序列左右同源臂的重组质粒；其次将重组质粒化学转化至牛源大肠杆菌中，在28℃传代诱导双交换重组，PCR筛选出缺失靶基因序列的菌株，之后在无抗生素培养基中37℃诱导质粒丢失，从而获得缺失潜在毒力基因相关序列的菌株。该遗传操作系统质粒较小，操作容易，应用广泛，不存在潜在的脱靶效应，敲除效率较高，无抗性基因筛选标记，为牛源大肠杆菌基因工程疫苗的研发提供了优良工具。
基本信息
专利标题 ：
基于Ngpiwi蛋白介导的牛源大肠杆菌基因敲除菌株及其构建方法
专利标题（英）：
暂无
公开（公告）号 ：
CN109593694A
申请号 ：
CN201811318486.8
公开（公告）日 ：
2019-04-09
申请日 ：
2018-11-07
授权号 ：
CN109593694B
授权日 ：
2022-04-22
发明人 ：
张安定付磊韩丽靳泽华周红波
申请人 ：
华中农业大学
申请人地址 ：
湖北省武汉市洪山区狮子山街1号
代理机构 ：
武汉开元知识产权代理有限公司
代理人 ：
王和平
优先权 ：
CN201811318486.8
主分类号 ：
C12N1/21
IPC分类号 ：
C12N1/21 C12N15/70 C12R1/19
相关图片
IPC结构图谱
C
C部——化学；冶金
C12
生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程
C12N
微生物或酶；其组合物；繁殖、保藏或维持微生物；变异或遗传工程；培养基。
C12N1/00
微生物本身，如原生动物；及其组合物；繁殖、维持或保藏微生物或其组合物的方法；制备或分离含有一种微生物的组合物的方法；及其培养基
C12N1/20
细菌；其培养基
C12N1/21
引入外来遗传物质修饰的
法律状态
2022-04-22 ：
授权
2019-05-03 ：
实质审查的生效
IPC(主分类) : C12N 1/21
申请日 : 20181107
申请日 : 20181107
2019-04-09 ：
公开
注：本法律状态信息仅供参考，即时准确的法律状态信息须到国家知识产权局办理专利登记簿副本。
文件下载
1、
CN109593694A.PDF
PDF下载
