本发明属于3D生物打印技术领域，具体涉及一种3D打印生物墨水及其制备与应用。所述生物墨水包括海藻酸钠溶液、透明质酸‑蛋白‑壳聚糖体系以及细胞膜包裹体系。本发明改良了生物墨水的韧性，构建透明质酸‑蛋白‑壳聚糖基质，同时加入纤连蛋白、层粘连蛋白、弹性蛋白，这些蛋白不仅可以稳定地存在于生物墨水中，还可以促进体外细胞的生长。细胞膜包裹技术的应用，大大提高了蛋白的利用率。细胞膜包裹层粘连蛋白、弹性蛋白以及磷酸鞘氨醇加入生物墨水，更好地使作用蛋白与打印细胞特异性结合，降低了蛋白的降解速率，为打印结构的体外培养提供长期的蛋白营养支持,并且能够较长时间的维持打印结果的完整性。