本实用新型提供一种核酸样本恒温荧光检测设备，属于荧光检测技术领域，包括检测箱、控制面板和盖板，控制面板固定连接于检测箱的前端，盖板设置于检测箱的顶部，检测箱的前端下方开设有通孔，通孔的内部插入有调节杆，检测箱的内部固定连接有内框，内框的前端与通孔的同一高度处开设有与通孔等长的内通孔，内框的下端固定连接有第一金属棒，第一金属棒的一侧连接有第二金属棒，第二金属棒的一侧连接有第三金属棒。该种核酸样本恒温荧光检测设备可在单独的一个检测设备内实现多种不同的温度区间，进而对核酸提供不同的温度环境空间，利于得知核酸在不同温度环境下的实验数值，降低了对检测设备的使用成本，实用性强。