一种快速高效的DNA 5’侧翼序列克隆方法
实质审查的生效
摘要
本发明公开了一种快速高效的DNA5’侧翼序列克隆方法，包括以下2个主要步骤：(1)待测样本为模板，通过不同LAD引物组合与基因特异性R引物配对，使用热不对称交错PCR的方法进行第一轮PCR扩增；(2)以不同稀释倍数的第一轮PCR扩增产物作为模板，结合巢式PCR的引物设计方法，使用通用引物AC1与设计在第1轮特异性R引物上游的不同基因特异性R引物配对，通过热不对称交错PCR的方法进行第二轮PCR扩增。配合判断方法能够快速鉴别正确扩增条带范围，在原HiTail‑PCR的基础上由3轮扩增缩减为2轮扩增，且可由特异引物之间的已知间隔距离快速锁定特异扩增并排除部分非特异扩增，大幅减少非特异扩增带来的干扰。
基本信息
专利标题 ：
一种快速高效的DNA 5’侧翼序列克隆方法
专利标题（英）：
暂无
公开（公告）号 ：
CN114540341A
申请号 ：
CN202210033141.8
公开（公告）日 ：
2022-05-27
申请日 ：
2022-01-12
授权号 ：
暂无
授权日 ：
暂无
发明人 ：
龚春梅李佳阳任洁洁珠拉太周文菲唐磊余有本白娟周杰王文钊
申请人 ：
西北农林科技大学
申请人地址 ：
陕西省咸阳市杨凌区邰城路3号
代理机构 ：
北京慕达星云知识产权代理事务所(特殊普通合伙)
代理人 ：
崔自京
优先权 ：
CN202210033141.8
主分类号 ：
C12N15/10
IPC分类号 ：
C12N15/10 C12Q1/686 C12N15/11
IPC结构图谱
C
C部——化学；冶金
C12
生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程
C12N
微生物或酶；其组合物；繁殖、保藏或维持微生物；变异或遗传工程；培养基。
C12N15/00
突变或遗传工程；遗传工程涉及的DNA或RNA，载体或其分离、制备或纯化；所使用的宿主
C12N15/09
DNA重组技术
C12N15/10
分离、制备或纯化DNA或RNA的方法
法律状态
2022-06-14 ：
实质审查的生效
IPC(主分类) : C12N 15/10
申请日 : 20220112
申请日 : 20220112
2022-05-27 ：
公开
注：本法律状态信息仅供参考，即时准确的法律状态信息须到国家知识产权局办理专利登记簿副本。
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