本发明公开了一种细菌纤维素多孔纤维及其制备方法与应用。细菌纤维素多孔纤维的制备方法中，先将细菌纤维素、氧化细菌纤维素与碱性溶液混合，得到混合纤维素分散液，细菌纤维素在碱性条件下能稳定存在，如此，形成细菌纤维素和氧化细菌纤维素混合分散均匀的混合纤维素分散液；然后以混合纤维素分散液为纺丝原液、稀硫酸为凝固浴进行湿法纺丝，制得的细菌纤维素多孔纤维中的纳米纤丝间不易发生不可回复的相对滑移，具有稳定的三维网络多孔结构。