本发明公开了一种茶叶提高氨基丁酸抑制咖啡因含量的制备方法，包括如下仪器和量具：双泵高效液相色谱仪、超声波清器、一级滤膜、二级滤膜、超精度电子称量器、三组50ml和三组150ml烧杯、色谱柱、紫外检测器；包括如下原料标本和流动相溶液：咖啡因标准样品、甲醇溶液、癸烷磺酸钠溶液、磷酸溶液、二次去离子水，通过原料标本粉碎处理、原料标本过滤处理、流动相溶液配比、超声萃取、色谱检定以及实验结果一系列方法步骤配合，可对三种不同流动相溶液对咖啡因含量抑制效果和提高氨基丁酸含量进行快速检定操作，缩短咖啡因含量抑制实验的周期，再通过采用高效液相色谱法对咖啡因含量抑制提高氨基丁酸含量效果进行准确检定。