一种检测CRISPR基因编辑脱靶的方法
公开
摘要
一种检测CRISPR基因编辑脱靶的方法,包括细胞交联、抗体固定、超声处理、染色质免疫共沉淀、DNA纯化、DNA处理、文库扩增七个步骤。本发明在多个步骤共同作用下,通过对CRISPR/Cas9基因编辑过程中Cas9蛋白和靶位点和细胞自身修复蛋白H2AX、MRE11与靶位点形成的蛋白‑核酸复合体进行免疫共沉降,并结合测序及其他必要技术手段,实现对脱靶位点的筛选,极大地简化了识别脱靶效应的过程,同时也提高了结果的准确性,能为更好预测基因组编辑如何在临床环境中发挥作用起到有力技术支撑。克服了现有技术限制,存在检测周期较长,灵敏度低的缺点,以及检测过程时间较长,步骤繁琐,且不能保证所有断裂位点都被标记的弊端。基于上述,使用本发明具有好的应用前景。
基本信息
专利标题 :
一种检测CRISPR基因编辑脱靶的方法
专利标题(英):
暂无
公开(公告)号 :
CN114574551A
申请号 :
CN202210101949.5
公开(公告)日 :
2022-06-03
申请日 :
2022-01-27
授权号 :
暂无
授权日 :
暂无
发明人 :
许志敏李红梅许世冲王春晓
申请人 :
上海达澈生物科技有限公司
申请人地址 :
上海市松江区泗泾镇泗砖路639号10幢201室-62
代理机构 :
北京深川专利代理事务所(普通合伙)
代理人 :
徐文昌
优先权 :
CN202210101949.5
主分类号 :
C12Q1/6804
IPC分类号 :
C12Q1/6804
IPC结构图谱
C
C部——化学;冶金
C12
生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
C12Q
包含酶、核酸或微生物的测定或检验方法;其所用的组合物或试纸;这种组合物的制备方法;在微生物学方法或酶学方法中的条件反应控制
C12Q1/64
•地质微生物试验,如用于石油
C12Q1/68
包括核酸
C12Q1/6804
利用免疫原的核酸分析
法律状态
2022-06-03 :
公开
注:本法律状态信息仅供参考,即时准确的法律状态信息须到国家知识产权局办理专利登记簿副本。
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