本发明公开了一种用于脐带间充质干细胞培养的添加剂，包括以下成分：L‑谷氨酰胺、胰岛素、维生素C、山药肽、红大戟素、丙酮酸钠、表皮生长因子。该添加剂中包括山药肽、红大戟素等成分有效提高脐带间充质干细胞的增殖活性，和其他成分一起为脐带间充质干细胞的增殖提供充足的营养，促进脐带间充质干细胞的分裂增殖，进而提高脐带间充干细胞的体外扩增效率，并且细胞保持较好的分化活性。本发明的添加剂不含动物源性成分，安全性更高。本发明还添提供了一种脐带间充质干细胞培养基，由基础培养基和上述添加剂组成，成分明确，成本低。本发明还提供了一种上述培养基的制备方法，制备过程简便，易于操作，有助于实现商业化生产。