本申请涉及干细胞培养技术领域，具体公开了一种脂肪间充质干细胞的培养基和培养方法。所述培养基包括基础培养基和血清替代物；血清替代物包括以下组分：人血清白蛋白、转铁蛋白、纤粘连蛋白、层粘连蛋白、雌二醇、辅酶A、牛磺酸、丙酮酸、血管内皮生长因子、血小板衍生生长因子、碱性成纤维细胞生长因子、转化生长因子‑α、转化生长因子‑β、L‑谷氨酰胺、胰岛素样生长因子‑I、白细胞介素‑21、胰酶抑制剂、蛋白酶抑制剂、人重组蛋白PDCD5、藁本内酯、川芎内酯、地黄苷、黄芩素、芍药苷。所述培养方法包括以下步骤：将原代或传代细胞重悬在培养基中得到脂肪间充质干细胞重悬液，培养。本申请提高体外脂肪间充质干细胞的增殖能力。