本发明属于细胞外泌体制备技术领域，公开了一种间充质干细胞外泌体的分离和miRNA分析方法。本发明分离方法包括：从儿童包皮中获取并培养儿童包皮间充质干细胞，离心去除死细胞和细胞碎片，再经超速离心得儿童包皮间充质干细胞外泌体。miRNA的分析方法采用高通量测序法。本发明使用的儿童包皮组织属于手术废弃物，获取时不涉及伦理问题，且儿童包皮组织含有大量的间充质干细胞，通过超速离心法可分离出大量纯净的外泌体，高通量测序发现这些外泌体中表达更多的免疫抑制相关基因和趋化基因，对治疗炎症相关疾病具有指导作用。