一种虹鳟鱼肝细胞系的建立方法
公开
摘要
本发明公开了一种虹鳟鱼肝细胞系的建立方法，属于鱼类细胞培养技术领域。本发明通过组织块培养法、酶消化法、肝细胞原代培养基的优化、台盼蓝染色、CCK‑8法、糖原染色、透射电镜鉴定、虹鳟肝细胞支原体检测这八个步骤予以实现。本发明组织块分离法并不适用于虹鳟鱼肝细胞分离，在培养过程中未见细胞从组织块中迁出，而胰蛋白酶消化法获得良好稳定的分离效果，经0.25％胰蛋白酶消化25min，每克肝重可收集细胞数量达到1.8×108个，平均细胞存活率达到95％；不同培养基和不同血清浓度均会影响细胞贴壁以及生长，含15％FBS DMEM培养基生长效果明显优于MEM、M199以及L15培养基。
基本信息
专利标题 ：
一种虹鳟鱼肝细胞系的建立方法
专利标题（英）：
暂无
公开（公告）号 ：
CN114621913A
申请号 ：
CN202210297354.1
公开（公告）日 ：
2022-06-14
申请日 ：
2022-03-24
授权号 ：
暂无
授权日 ：
暂无
发明人 ：
刘哲赵桂研权金强
申请人 ：
甘肃农业大学
申请人地址 ：
甘肃省兰州市安宁区营门村1号
代理机构 ：
北京盛凡佳华专利代理事务所(普通合伙)
代理人 ：
胡欢
优先权 ：
CN202210297354.1
主分类号 ：
C12N5/071
IPC分类号 ：
C12N5/071 C12Q1/02 C12Q1/04 C12R1/91
IPC结构图谱
C
C部——化学；冶金
C12
生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程
C12N
微生物或酶；其组合物；繁殖、保藏或维持微生物；变异或遗传工程；培养基。
C12N5/00
未分化的人类、动物或植物细胞，如细胞系；组织；它们的培养或维持；其培养基
C12N5/07
动物细胞或组织
C12N5/071
脊椎动物细胞或组织，例如人类细胞或组织
法律状态
2022-06-14 ：
公开
注：本法律状态信息仅供参考，即时准确的法律状态信息须到国家知识产权局办理专利登记簿副本。
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