本发明涉及N－琥珀二酰壳聚糖自组装纳米微粒及制备方法。本发明将壳聚糖加入乙酸水溶液至溶解，将琥珀酸酐溶于无水丙酮中，将琥珀酸酐的丙酮溶液加入到壳聚糖乙酸水溶液中，升温、搅拌，并冷却至室温，在无水丙酮中沉淀、抽滤，洗涤，在40℃温度下真空干燥得N－琥珀二酰壳聚糖白色固体，将其分散于蒸馏水中，在30℃、磁力搅拌下，得N－琥珀二酰壳聚糖自组装纳米微粒。本发明解决了现有技术存在的影响大分子物质的释放或非均相反应，制备条件苛刻等缺陷。本发明的效果在于将琥珀酸酐与壳聚糖搂比例投料首次制备得到自组装成纳米微粒的N－琥珀二酰壳聚糖，其水分散体系非常稳定，且纳米粒径尺寸特别适用于大分子药物、生物活性大分子的包埋与释放。