本发明公开了一种达托霉素的检测方法，属于药物检测分析技术领域，该检测方法采用超高效液相色谱法进行检测，具体公开了检测的色谱条件。本发明提供的达托霉素的检测方法，可有效检测出待测样品中达托霉素及其有关物质，并能进行定量，该方法对主成分及各杂质分离度良好，脱尾因子低，拥有低检测周期，低检测成本，高灵敏度，高准确度，高精密度，线性水平好，专属性强，耐用性好等优点，且由于其周期短、成本低且检测准确的特性，可广泛的在生产企业、检测中心中推广使用，有助于实现达托霉素的质量控制，制备得到高纯度、高品质的达托霉素。