本发明提出了一种激光光斑中心定位方法及测试系统。方法包括：获取激光光斑图像；对获取的激光光斑图像进行光斑保边界去噪预处理；确定预处理后的激光光斑图像的光斑面积；根据光斑面积计算半径并构造disk掩膜；使用掩膜对激光光斑图像进行遍历和模板匹配，确定激光光斑图像中的光斑最大能量中心点。本发明提出的激光光斑中心定位方法及测试系统，大大节省了光斑质量测试试验成本，有效实现远距离下激光光斑中心实时定位。并且该方法在近场光斑与远场不规则光斑的中心检测均具有优异鲁棒性和准确性，提高了光斑性能检验精度，从而指导该类产品的指标设计，缩短同类产品的研制周期与经费。