本发明公开了一种基于上转换‑分子印迹荧光传感器的多菌灵快速检测方法，步骤为：合成以甲基丙烯酰胺为功能单体、以多菌灵为模板分子的分子印记聚合物作为识别元件，将聚合物涂层嫁接到已制备好的上转换荧光纳米材料上合成上转换‑分子印迹荧光传感器；在多菌灵存在的情况下，它将特异性地与分子印迹聚合物空腔结合以诱导电子转移，导致上转换‑分子印迹荧光传感器的荧光淬灭；通过测定待测样品淬灭前后荧光强度的变化，实现多菌灵含量的检测；检测范围为0.01‑10μg/mL，检测限为0.0036μg/mL。本发明构建的上转换‑分子印迹荧光传感器具有高灵敏度和高选择性，在实际检测中有很低的检测限，应用前景良好。