一种基于核酶-CRISPR的食品铅污染检测方法
公开
摘要
本发明公开了一种基于核酶‑CRISPR的食品铅污染检测方法，利用核酶对铅离子的高度选择性及CRISPR相关蛋白Cas12a的反式切割活性的灵敏性对铅离子进行高灵敏定性、定量分析。通过报告分子的荧光强度变化指示铅离子的存在与否及浓度变化情况，将痕量铅离子浓度信号转化为荧光信号，提高检测灵敏度，降低实验检出限。同时避免了核酸扩增带来的假阳性问题。铅离子作为核酶酶链的辅酶，可以激活酶链的酶切活性并高效地切割底物链，缩短反应时间，为食品、环境中的痕量铅污染的快速检测提供了可能。本发明是不依赖于扩增的一管混反应，不仅灵敏，同时简化了实验操作。本发明对向导RNA(gRNA)的序列、预引物的长度、dsDNA靶标的长度及核酶臂长进行了优化，检出限为0.027nM。
基本信息
专利标题 ：
一种基于核酶-CRISPR的食品铅污染检测方法
专利标题（英）：
暂无
公开（公告）号 ：
CN114480581A
申请号 ：
CN202210171887.5
公开（公告）日 ：
2022-05-13
申请日 ：
2022-02-24
授权号 ：
暂无
授权日 ：
暂无
发明人 ：
何强刘玉梅赵志峰邓锐杰蒋琼
申请人 ：
四川大学
申请人地址 ：
四川省成都市武侯区一环路南一段24号
代理机构 ：
成都方圆聿联专利代理事务所(普通合伙)
代理人 ：
邓永红
优先权 ：
CN202210171887.5
主分类号 ：
C12Q1/6818
IPC分类号 ：
C12Q1/6818 C12Q1/682 C12N15/113
IPC结构图谱
C
C部——化学；冶金
C12
生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程
C12Q
包含酶、核酸或微生物的测定或检验方法；其所用的组合物或试纸；这种组合物的制备方法；在微生物学方法或酶学方法中的条件反应控制
C12Q1/64
•地质微生物试验，如用于石油
C12Q1/68
包括核酸
C12Q1/6813
杂交分析
C12Q1/6816
以检测方法为特征
C12Q1/6818
包括至少两个标记的相互作用，例如共振能量转移
法律状态
2022-05-13 ：
公开
注：本法律状态信息仅供参考，即时准确的法律状态信息须到国家知识产权局办理专利登记簿副本。
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