本发明公开了一种活性益生菌的制备方法，得到培养液与取接种完成后的乳杆菌、革兰氏阳性球菌和双歧杆菌，加入酵母菌、醋酸菌、光合细菌、放线菌和芽孢杆菌，得到待发酵的混合菌液，均匀混合后发酵得到产品。该活性益生菌的制备方法，加速了益生菌在培养液中的快速扩散，同时培养液内的各种成分，既满足益生菌的繁殖条件，同时还为益生菌的繁殖提供了足够的能量供应，以实现更大程度上益生菌的生产繁殖。