本发明涉及实验室自动化技术领域，公开了一种卷状膜片剥离装置，包括固定侧板，在固定侧板内侧设置膜卷辊、压力辊组、揭膜刀、拉力辊组和收卷辊，所述膜卷辊、压力辊组、揭膜刀的刀口长度方向、拉力辊组和收卷辊的辊轴互相平行，垂直设置在固定侧板的内侧，所述拉力辊组和收卷辊为主动辊组，卷膜从膜卷辊输出后，经压力辊组、揭膜刀、拉力辊组，收卷于收卷辊上，所述拉力辊组对卷膜产生拉力，使卷膜在拉力辊组和压力辊组之间产生张力，所述张力将卷膜上的膜片剥离，所述收卷辊与压力加辊组保持同步。本发明还公开了卷状膜片剥离方法。本发明精确定位膜片位置，揭膜过程快速防偏差。