简便RNA建库方法
实质审查的生效
摘要
本发明提供一种简便RNA建库方法，其特征在于：其步骤包括：(1)提取样本中RNA，加入逆转录引物和rRNA逆转录阻碍探针并片段化；(2)RNA逆转录，获得DNA/RNA杂交双链；(3)接头连接：使用T4 DNA连接酶突变体K159L在DNA/RNA杂交链cDNA 3’端连上带有腺苷酰化修饰的平末端双链DNA接头；(4)文库扩增及回收。本发明的简便RNA建库方法，利用DNA连接酶突变体K159L可以高效连接DNA/RNA杂交链的原理，只需要RNA片段化、逆转录、接头连接、文库扩增和磁珠回收5步，极大地简化了RNA建库的流程和耗时。结合使用rRNA逆转录阻碍探针快速去除rRNA的技术，可以在一管内完成rRNA去除和RNA建库。整个过程仅需2h，操作简单、RNA损失小、成本低，非常适用于RNA自动化建库和低丰度RNA建库。
基本信息
专利标题 ：
简便RNA建库方法
专利标题（英）：
暂无
公开（公告）号 ：
CN114410741A
申请号 ：
CN202111682559.3
公开（公告）日 ：
2022-04-29
申请日 ：
2021-12-31
授权号 ：
暂无
授权日 ：
暂无
发明人 ：
宋东亮王嫚侯策刘倩孙睿江翱陈晶晶曹振
申请人 ：
翌圣生物科技（上海）股份有限公司
申请人地址 ：
上海市浦东新区天雄路166弄1号楼402室
代理机构 ：
苏州根号专利代理事务所(普通合伙)
代理人 ：
朱华庆
优先权 ：
CN202111682559.3
主分类号 ：
C12Q1/6806
IPC分类号 ：
C12Q1/6806 C12N15/10 C40B50/06 C12N15/11
IPC结构图谱
C
C部——化学；冶金
C12
生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程
C12Q
包含酶、核酸或微生物的测定或检验方法；其所用的组合物或试纸；这种组合物的制备方法；在微生物学方法或酶学方法中的条件反应控制
C12Q1/64
•地质微生物试验，如用于石油
C12Q1/68
包括核酸
C12Q1/6806
制备用于分析的核酸，例如用于聚合酶链式反应分析
法律状态
2022-05-20 ：
实质审查的生效
IPC(主分类) : C12Q 1/6806
申请日 : 20211231
申请日 : 20211231
2022-04-29 ：
公开
注：本法律状态信息仅供参考，即时准确的法律状态信息须到国家知识产权局办理专利登记簿副本。
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