本实用新型公开了一种全自动DNA和文库均一化设备，包括设备主体、提取设备、取样针、试剂仓、震动混合模块以及控制模块，所述设备主体内安装有提取设备，所述提取设备底部安装有呈并列对称式分布的取样针，所述取样针正下方设有呈并列式分布的试剂仓，所述试剂仓一侧安装有震动混合模块，所述震动混合模块包括混合仓、底板、震动器以及连接杆，所述混合仓底部设有底板，所述底板内安装有震动器，所述震动器顶部与连接杆底部进行焊接，所述连接杆顶部通过螺栓连接混合仓底部。该全自动DNA和文库均一化设备可实现98个样本同时进行操作，从而大大提高工作效率，且震动混合模块的设置，可带动混动仓内的液体进行震动，实现充分混液。