本发明适用于生物科学技术领域，提供了一种结直肠癌PDX模型构建的方法，包括以下步骤：S1：采集人结直肠癌样本，并进行运输和保存；S2：培养人结直肠癌原代细胞，并进行传代培养；S3：细胞换液和传代冻存，并在人结直肠癌原代细胞进行冻存时对细胞进行计数；S4：细胞鉴定：培养人结直肠癌原代细胞，并对培养的细胞进行免疫荧光鉴定与HE染色鉴定；S5：细胞接种；S6：对肿瘤组织进行取材和固定后，进行人结直肠癌PDX模型构建观察和指标检测，本发明对人结直肠癌原代细胞的培养方法进行优化，并构建结直肠癌PDX模型，分别从体内和体外为结直肠癌患者选择不同的抗肿瘤药物筛选，制定个体化的精准用药方案奠定基础，操作流程简单可靠。