本发明公开了一种负载活细胞的胎盘脱细胞基质凝胶的制备，步骤如下：胎盘组织的预处理，胎盘组织病毒灭活处理，去除病毒灭活溶液残留，组织进行三次循环冻融处理，脱细胞处理，去除脱细胞溶液残留，组织经过干燥、球磨后，进行辐照灭菌；灭菌后粉末添加生理盐水溶解后，加入提取的活细胞混匀后置于不同的模具中，置于37℃培养箱内10‑20min即可形成凝胶。本发明采用上述的一种负载活细胞的胎盘脱细胞基质凝胶的制备及应用，制备的凝胶可以负载多种细胞并支持细胞的生长，成胶时间短，可改善细胞的活力以及死亡率。