本发明涉及分子检测技术领域，尤其是一种电致化学发光分子印迹传感器及其制备方法及应用，现提出如下方案，制备方法包括如下步骤：将10％‑15％wt的聚丙烯腈溶液通过静电纺丝制备得到聚丙烯腈电极；将Ru(bpy)₃²⁺分散于有机溶剂中得到1‑3mM Ru(bpy)₃²⁺溶液，将其加在聚丙烯腈电极上得到钌纳米棒修饰的聚丙烯腈电极；将盐酸多巴胺溶解于Tris‑HCl缓冲液中，再加入检测靶标，得到混合溶液；将所述钌纳米棒修饰的聚丙烯腈电极置于混合溶液中浸泡，得到中间产物；用醇溶剂洗脱中间产物上的检测靶标，得到电致化学发光分子印迹传感器。本发明制备方法制备工艺简单，制备得到的PANE‑MIP具有强的吸附能力和良好的选择性，传感器具有高灵敏度，稳定性好，可长期保存，直接用于现场检测。