本实用新型公开了在Western Blot中配合化学发光成像系统的辅助曝光盒子，其包括盒体，所述盒体从下到上依次设有置膜层、透明层和遮掩层，所述置膜层上设有内陷的凹槽，所述盒体、置膜层和遮掩层均由非透光材料制成，所述透明层由透光材料制成。本实用新型的辅助曝光盒子大大降低了化学发光成像系统曝光实验的操作难度，置膜层的凹槽可用于放置需曝光的膜，并能防止曝光液四处流动，使膜上均匀覆盖曝光液。在曝光过程中，位于置膜层上方的透明层不会影响膜的曝光，还能起到阻隔作用，减少曝光液的蒸发。当膜上出现信号较高的非特异性条带时，可用遮掩层进行遮挡，继续曝光目的条带，相比于采用黑卡片进行遮挡，本实用新型的操作更方便，效果更好。